Лабораторная диагностика 2 - дисбактериоз у детей

К преимуществам биохимического метода можно отнести относительную несложность транспортировки образцов, доступность, небольшую стоимость, простоту, а главное - скорость получения ответа. Несмотря на эффективность, метод пока не получил широкого распространения в клинической практике из-за ограниченной доступности. В связи с этим был разработан и апробирован более простой тест, определяющий протеолитическую активность фекалий (казеинолитический тест). Проведенные исследования показали исключительно высокую прямую корреляцию протеолитической активности фекалий со степенью дисбактериоза. Но эти методы дают возможность лишь заподозрить наличие нарушения микробиоценоза кишечника. Для того чтобы провести эффективную коррекцию, необходимо знать вид микроорганизма, определить чувствительность к бактериофагам и антибиотикам, а также определиться с применением тех или иных пробиотиков. Все это дает возможность определить только бактериологический метод, который является основным при диагностике дисбиоза кишечника.

3. Бактериологическое исследование микрофлоры испражнений (Р.В. Эпштейн-Литвак, 1977). Для проведения бактериологического анализа кала на дисбактериоз забор фекалий в количестве 20 -30 грамм производят из последней порции фекалий в стерильную посуду стерильным инструментом.

Так как анаэробные бактерии до момента посева недолжны контактировать с кислородом, необходимо использовать пробирки с притертыми пробками, заполненные газом (СO2 - 40% + пропан - 60% или СO2 - 5% + Н2 - 10% + N2 -85%). Срок доставки материала в лабораторию с момента его забора - не более 2 часов. При невозможности доставки материала в указанный срок, допустимо его хранение в холодильнике при 4°С не более 6 часов.

Наиболее прост качественный метод исследования. Он позволяет выявить качественные изменения облигатной и факультативной флоры. В основе его лежит определение процентного соотношения колоний микроорганизмов (табл. 2).
Таблица 2
Состав микрофлоры фекалий здоровых детей

Методом, более отвечающим требованиям клиники, является количественный метод. Результаты бактериологического исследования трактуются с учетом возрастных норм (табл. 3 по данным В.М.Коршунова и соавт.,1999- Б.А.Безкаравайного и соавт., 2000).

Таблица 3 Состав микрофлоры фекалий здоровых детей
в зависимости от возраста и вида вскармливания (КОЕ/г)

Примечание: * - Обнаруживаются у детей старше 3-х месяцев.

Помимо изменения общего количества микроорганизмов и нарушения нормального соотношения между отдельными представителями микробного ценоза кишечника выражением дисбактериоза может быть и изменение свойств с появлением патологических признаков у отдельных бактериальных симбионтов. Обнаруживается гемолизирующая флора, кишечные палочки со слабо выраженными ферментативными свойствами, энтеропатогенные кишечные палочки и т.д. К основным недостаткам метода относятся: трудоемкость, высокая стоимость, длительность проведения анализа, относительная субъективность полученных результатов, а главное - недооценка роли многих до настоящего времени не культивируемых представителей микробиоценозов кишечника. Кроме того, этот метод также грешит возможностью получения несходящихся результатов при повторном обследовании пациента - как следствие различного роста бактерий в условиях организма хозяина (in vivo) и на искусственных питательных средах (in vitro). Он отражает микробный состав лишь дистальных отделов кишечника (прямой и части сигмовидной кишки), выявляя панораму только аэробной флоры и оставляя в тени около 500 видов анаэробов и состав тонкокишечной микрофлоры. Кроме того, микробиологическое исследование кала дает возможность судить только о просветной микрофлоре, которая подвержена значительным изменениям, в отличие от пристеночной.

4. Бактериологическое исследование соскоба со слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при эндоскопическом исследовании, прямой кишки при ректороманоскопии, колоноскопии, а также кишечного содержимого и желчи.
Бактериологическое исследование соскоба слизистой оболочки двенадцатиперстной или проксимальной части тощей кишки, а также смывов с данных отделов методом еюноперфузии возможно только при эндоскопическом исследовании желудка и тощей кишки. Анализ позволяет выявить дисбактериоз проксимальных отделов кишечника. Показателями являются увеличение степени микробной обсемененности свыше 104- 105 КОЕ /мл или г (при биопсии слизистой), а также если определяются микроорганизмы, находящиеся в толстой кишке (энтеробактерии, бактероиды, клостридии и др.) и редукция лактобацилл.

Бактериологическое исследование соскоба со слизистой оболочки толстой или прямой кишки, выполняемое при колоноскопии или ректороманоскопии, позволяет оценить пристеночную микрофлору кишечника.

5. Для выяснения причины развития кишечного дисбактериоза проводят рентгенологическое, эндоскопическое и ультразвуковое исследование органов желудочно-кишечного тракта, а также компьютерную томографию брюшной полости.