Диагностика энтеровирусной инфекции
Видео: Энтеровирусная инфекция. Кишечный грипп
Обычно энтеровирусную этиологию можно заподозрить на основании клиническом картины, особенно если имеются такие относительно специфические синдромы, как пузырчатка полости рта, конечностей или герпангина.
Ключами к диагностике энтеровирусной инфекции также может стать сезонность заболевания, вспышка среди населения или контакт с больным предположительно энтеровирусной инфекцией. У новорожденных на энтеровирусную инфекцию указывают соответствующий сезон года и наличие в анамнезе у матери лихорадки, недомогания или боль в животе незадолго до или после родов.
Эталонный метод диагностики энтеровирусных инфекций — посев на вирус с использованием комбинации клеточных линий. Чувствительность посева составляет 50-75%. При посеве материала из нескольких мест чувствительность повышается. Например, у ребенка с менингитом шанс выделить вирус возрастает, если для посева используется не только СМЖ, но и отделяемое глотки, материал из прямой кишки. У новорожденных высокая частота обнаружения вируса наблюдалась, если помимо мазков со слизистых оболочек на посев направлялись кровь, моча и СМЖ. Серьезным недостатком посева служит то, что большинство вирусов Кок- саки А не растут in vitro. Вирусы Коксаки А можно выделить путем заражения мышат-сосунков, однако эта методика доступна, главным образом, исследовательским центрам. На результатах посева отрицательно сказывается присутствие нейтрализующих антител в материале, неправильная техника взятия материала и обращения с ним, а также невосприимчивость используемой клеточной линии к данному вирусу. Кроме того, культуральный метод диагностики энтеровирусных инфекций отнимает много времени (обычно рост становится заметным через 3-8 сут). Исследование на антигены вируса позволяет быстрее обнаружить вирус, но обладает низкой чувствительностью- его комбинируют с посевом. В целом, если удалось обнаружить энтеровирус методом посева, это свидетельствует о недавней инфекции, однако если материалом служит мазок из прямой кишки или кал, присутствие вируса может говорить и о его выделении после инфекции, произошедшей довольно давно. Аналогично выделение вируса со слизистых оболочек лишь указывает на возможную его связь с заболеванием, а выделение вируса из жидкостей, в норме стерильных, таких как СМЖ и кровь, а также из тканей — убедительное доказательство его этиологической роли. Серотип определяется в специализированных лабораториях с помощью нейтрализующих антисывороток. Определение серотипа, как правило, требуется лишь для исследования вспышки либо инфекции с необычными проявлениями, а также чтобы отличить вирус полиомиелита (вакцинный или дикий штамм) от прочих энтеровирусов.
Видео: Как защититься от энтеровирусной инфекции? Школа здоровья 26/07/2014 GuberniaTV
Прямое исследование материала, полученного от больного, на антиген или РНК энтеровирусов разрабатываются, чтобы преодолеть недостатки культурального метода диагностики энтеровирусных инфекций — недостаточную чувствительность и отсроченное получение результатов. Определение антигенов, например, с помощью ELISA пользовалось некоторым успехом, однако его чувствительность невысока из-за того, что не существует поверхностных антигенов, одинаковых для большинства энтеровирусов. Лучших результатов позволила добиться ПЦР с обратной транскрипцией, в которой определяются высококонсервативные участки 5-некодирующего региона генома энтеровирусов. Данный метод, который обнаруживает большинство энтеровирусов (однако ЕСНО-вирусы 22 и 23, как правило, не выявляются), был применен для исследования самых разнообразных материалов — СМЖ, крови, мочи, отделяемого с конъюнктив, из носоглотки, глотки и материала из прямой кишки. Чувствительность и специфичность оказались высокими, кроме того, анализ можно выполнить за 5 ч. ПЦР с СМЖ от детей с острым серозным менингитом и больных гипогаммаглобулинемией и хроническим энтеровирусным энцефалитом часто оказывается положительной, несмотря на отрицательные результаты посева. У новорожденных ПЦР с сывороткой и мочой чаще дает положительный результат, чем посев этих жидкостей. Доказано, что широкое применение ПЦР для исследования СМЖ детей младшего возраста с менингитом для диагностики энтеровирусных инфекций сокращает время обследования, продолжительность госпитализации, использование антибиотиков и общие затраты.
Видео: Рогозин Павел Федорович — Вспышка энтеровирусной инфекции в Ростове на Дону
Энтеровирусные инфекции также можно диагностировать серологически, либо по нарастанию титра нейтрализующих, связывающих комплемент и прочих типоспецифических антител, либо по наличию типоспецифических антител IgM. Однако для серологической диагностики необходимо заранее узнать серотип вызвавшего инфекцию вируса, либо путем выделения вируса от больного или контактного, либо в связи с эпидемией, вызванной известным серотипом. Чувствительность серодиагностики невысокая. В целом, за исключением эпидемиологических исследований, лучше использовать культуральный метод или методы анализа нуклеиновых кислот, а не методы серологической диагностики.
Диагноз энтеровирусной инфекции можно поставить, если вирус обнаружен в тканях, например в биоптате миокарда, печени или мозга. Для выявления вируса используют посев, ПЦР, гибридизацию нуклеиновых кислот in situ и РИФ.