Методические аспекты диагностики урогенитального хламидиоза

Видео: Урогенитальные инфекции

6. Преимущества метода ПЦР

В настоящее время метод ПЦР широко внедрен в практику здравоохранения и используется для диагностики вирусных и бактериальных инфекций. Метод ПЦР, «пройдя проверку временем, доказал экономичность и практическую эффективность» в использовании. Опыт использования ПЦР в диагностике хламидиозов показал ряд его преимуществ:

А) Прямое определение возбудителя.
Метод ПЦР, основанный на размножении ферментативным способом специфического участка гена возбудителя, дает возможность прямого определения микроорганизма в биологическом материале.

Б) Высокая специфичность метода ПЦР.
- в исследуемом материале выявляют наиболее устойчивую часть генома возбудителя, не изменяющую свою антигенную структуру ни при каких обстоятельствах - ни под воздействием защитных сил макроорганизма, ни при длительном приеме антибиотиков-
- в состав реакционной смеси входят праймеры, включающих в себя 30-50 олигонуклеотидных последовательностей, специфичных для С. tracomatis. Это позволяет, в отличие от иммунологических тест-систем, избежать ложноположительных реакций, связанных с перекрестной реакцией антител с антигенами;

В) Высокая чувствительность.
Возможность накопления ДНК с помощью цепной реакции, проходящей в программируемом термостате (амплификаторе), позволяет повысить порог чувствительности выделения микроорганизмов в исследуемом материале до несколько десятков клеток по сравнению с другими методами, где он достигает 10М06 микроорганизмов в исследуемом материале.

Г) Широкий спектр объектов исследования и универсальность процедуры выявления различных возбудителей.
ПЦР дает возможность анализа широкого спектра клинического материала.
Исследованию подвергаются уретральные, цервикальные, глоточные соскобы, моча, смывы со слизистой глаз, носоглотки, слюна и др. Универсальность метода заключается в возможности выявления в одном биологическом образце нескольких возбудителей инфекций. Возможность анализа любого клинического материала позволяет перейти от стандарта из инфицированного образца к обнаружению инфицированного пациента.

Д) ПЦР позволяет осуществлять диагностику латентных форм инфекции.
Многие бактерии и вирусы могут длительно находиться в латентной форме, присутствовать в мочеполовом тракте в малых количествах, изменять свои свойства под действием антибиотиков. Все вышеперечисленное снижает выявление возбудителей инфекций методами, основанными на иммунологических реакциях. Метод ПЦР, основанный на детекции размноженной ДНК, повышает эффективность диагностики заболеваний, вызванных бактериальными и вирусными инфекциями, характеризующиеся латентным течением. К ним относится и хламидийная инфекция.

Е) Быстрота выполнения метода ПЦР.
Определение возбудителя методом ПЦР осуществляется в течение одного рабочего дня. Использование амплификатора в режиме активного регулирования позволяет провести амплификацию в течение 1,5 часов, что сокращает время от начала обработки клинических образцов до получения результатов. Если учесть продолжительность процедуры выращивания культуры клеток, то преимущество метода ПЦР становится несомненным.

При существующих нормативах времени проведения ПИФ на одну инфекцию - от 20 до 30 минут - врач не может за рабочий день сделать и двух десятков анализов, в то время как современные модификации ПЦР позволяют «провести» за это время более чем на порядок большее число анализов.

Ж). Возможность использования метода ПЦР для проведения скрининговых обследований неинвазивными методами.
Высокая чувствительность метода, возможность исследования широкого спектра клинического материала, в том числе мочи, позволяет использоватьего для скрининга хламидийной инфекции.

Видео: 01 Жусман Ранняя диагностика

З). Метод ПЦР, как наиболее специфичный и чувствительный, может использоваться для оценки эффективности лечения (критерий излечения) больных.

Контрольное исследование нахламидиоз методом ПЦР проводится не ранее 1-1,5 месяцев после окончания лечения. Сроки (и сама необходимость) повторных контрольных исследований выбираются врачом, исходя из клинической ситуации. Важнейшим условием достоверного результата при контрольном исследовании является правильное получение материала.