Первичная оценка психотропной активности новых соединений - фармакологическая регуляция психических процессов

ПЕРВИЧНАЯ ОЦЕНКА ПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИИ
В задачу данного этапа исследования новых химических соединений входит следующее: а) выявить активность- б) определить ее тип- в) оценить выраженность активности и целесообразность дальнейшего исследования вещества.
Используемая нами схема первичных испытаний веществ на психотропную активность включает три группы тестов:

1. методы оценки спонтанного поведения животных, вызванных реакций- вегетативных симптомов;
2. инструментальные методы- регистрация двигательной ориентировочной активности мышей за 10 мин в регистраторе ДАЭР-20- измерение ректальной температуры- оценка реакций агрессии и страха в тесте «электропол» (в специальной клетке, на пол которой подается электроток заданных характеристик)- максимальный электрошок при использовании глазных электродов (50 мВ, 0,2 с, 50 Гц);
3. тесты взаимодействия испытуемого вещества с известными лекарственными веществами и стимуляторами медиаторных систем мозга: влияние на длительность гексеналового сна, длительность и выраженность апоморфиновой стереотипии, фенаминовой стереотипии- гиперкинез, вызванный ареколином, никотином, 5-окситриптофаном- судороги, вызванные максимальным электрошоком, коразолом (схема-карта).

                                                          Карта № (таблица)
первичного отбора психотропных средств
Название вещества                                                                                                                                         Шифр
Институт, лаборатория, синтезировавшая препарат
Растворитель
Вид и линия животных
Количество животных на одну дозу
Путь введения
Время наблюдения: в первые 30 мин- после введения через: 1, 3, 24 ч, 5 суток. В каждом периоде наблюдения использовались 5 доз.

Тесты взаимодействия испытуемого вещества с известными лекарственными препаратами

Данные ЭЭГ
Заключение об активности вещества
Рекомендации для дальнейшего исследования «             »              198 г. Подпись экспериментатора:
При выборе и оценке методов первичных испытаний новых химических соединений необходимо было руководствоваться следующими важными критериями. Набор экспериментальных тестов должен:

1. быть достаточно экономным и при минимальных затратах испытуемого вещества и животных давать максимально возможную информацию о его биологической активности;
2. адекватно характеризовать профиль, тип активности;
3. для этого отражать основной механизм действия тех групп фармакологических препаратов, к которым может быть отнесено Потенциально активное соединение.

Первичные испытания проводятся в два этапа на беспородных мышах или тетрагибридах, что позволяет сохранить разнообразие поведенческих реакций и в то же время идентифицировать условия опыта.

Организация и проведение первого этапа испытаний

Для проведения первого этапа испытаний требуется 18—20 мышей и 200—250 мг вещества. Желательно проводить эксперименты па самцах.
Готовится раствор вещества для 5 доз: 1, 10, 100, 500 и 1000 мг/кг, контрольная группа получает растворитель. До введения вещества всем животным измеряется ректальная температура. Наблюдение начинается сразу после введения вещества, результаты фиксируются через 30 мин, 1 ч, 3 ч после инъекции. По пятибалльной системе (от 0 до 4) оцениваются спонтанная активность, мышечный тонус, вызванные реакции на боль, прикосновение, звук. Оценку «0» получают животные, чье поведение не отличается от контроля. Признаки угнетения или возбуждения центральной нервной системы оцениваются от 1 до 4 баллов, «1» оценивают в случае слабой выраженности признака, «4» получают предельно выраженные симптомы. Так же оцениваются в случае их наличия признаки заинтересованности вегетативной нервной системы: птоз, экзофтальм, диарея, гипергидроз.
Через 1 ч после введения препарата мыши помещаются в регистратор двигательной активности и определяется количество движений за 10 мин. Следующий этап — повторное измерение температуры, сравнение с первыми показателями, определение средней величины изменения температуры тела в каждой группе животных. Затем изучается реакция пар самцов на раздражение электротоком лап самцов в специальной клетке с электрополом: определяется:
а)     выраженность писка в баллах (эквивалент «эмоциональной» реакции страха) при раздражении током 20 В- б) выраженность двигательной реакции (прыжки)- в) наличие драки- г) пороговое значение напряжения тока, при которой реакция опытных животных близка реакциям контрольной группы. Все оценки заносятся в соответствующие графы «Карты первичного отбора». На этом первый этап заканчивается. Все животные оставляются на 5 дней для дальнейшего наблюдения. Через 24 ч регистрируется гибель животных в каждой группе и определяется ориентировочная острая токсичность. При наличии новых эффектов, усилении выявленных накануне признаков вся группа животных подвергается всему комплексу исследований с оценкой каждого эффекта. В последующие 5 суток наблюдение продолжается с целью выявления продленных или отставленных эффектов и гибели животных.

Проведение второго этапа испытании

На следующий день после начала исследования проводится второй этап изучения вещества, требующий еще 250—750 мг вещества в новых групп животных (в зависимости от количества используемых на втором этапе тестов от 24 до 42 мышей). Второй день испытаний включает определение взаимодействия вещества с известными препаратами, снотворными, стимуляторами медиаторных систем мозга, выявление противосудорожной активности вещества. При этом исследуется одна доза вещества, равная 10% от ориентировочной ЛД50. Определяется влияние вещества на: 1) длительность гексеналового (60 мг/кг) сна- 2) длительность и выраженность апоморфиновой и фенаминовой стереотипии (2 и 6 мг/кг соответственно)- 3) апоморфиновую гипотермию- 4) длительность и выраженность ареколинового (25 мг/кг) гиперкинеза- 5) длительность и выраженность 5-окситринтофанового гиперкинеза- 6) птоз и гипотермию, вызванные резерпином (2 м/кг)- 7) длительность и выраженность никотинового (7 мг/кг) тремора- 8) длительность жизни и наличие судорог у животных, получивших коразол (150 мг/кг)- 9) наличие тонико-экстензорной фазы и гибель животных после максимального электрошока (50 мВ- 0,2 с- 50 Гц). Все испытуемые вещества вводятся за 45 мин до эксперимента внутрибрюшинно. В случае исследования взаимодействия с резерпином последний вводится за 4 ч до эксперимента, затем животные получают испытуемое вещество и через 45 мин оценивается изменение температуры, птоз и снижение двигательной активности.