О некоторых методах поиска препаратов-стимуляторов процесса возбуждения - фармакологическая регуляция психических процессов

В настоящее время отсутствуют специальные методические разработки для целей поиска веществ с описанным типом активности. До сих пор единственной группой препаратов, стимулирующих нервно-мышечную передачу, была группа ингибиторов холинэстеразы. Для их экспериментального поиска обычно пользовались двумя группами методов: а) биохимическими и б) физиологическими. В первом случае исследуется действие веществ на очищенные препараты холинэстеразы, во втором — влияние на нервно-мышечную передачу в опытах на прямой мышце живота лягушки, френико-диафрагмальном препарате и пр. Следует заметить, что изолированное применение одного из указанных подходов не всегда дает нужную и адекватную информацию. Выявление ингибирования холинэстеразы in vitro далеко не всегда подтверждается в экспериментах на целостных животных и нервно-мышечных препаратах. Помимо этого, довольно часто отмечается несоответствие между выраженностью антихолинэстеразного действия в пробирке и стимуляцией нервно-мышечной передачи [Прозоровский, Саватеев, 1976]. Использование только второго метода не разделяет препараты с разными типами стимулирующего действия на нервно-мышечные образования.
Поэтому нами разработана схема методов для первичного выявления и углубленного изучения веществ — стимуляторов проведения возбуждения в различных нервных, мышечных образованиях и нервно-мышечных синапсах.
На этапе первичных испытаний предлагается использовать следующий набор тестов, включающий:

1. изучение действия веществ на поведение животных по схеме, выявляющей центральные нейропсихотропные эффекты (см. главу третью);
2. влияние на очищенные препараты холинэстеразы;
3. воздействие на нервно-мышечную передачу (прямая мышца живота лягушки, френико-диафрагмальный препарат крысы);
4. антагонизм с курареподобными миорелаксантами (d-тубоку-рарином);
5. влияние на гладкомышечные объекты (матка, семявыносящий проток, кишка крысы) с использованием известных медиаторов — стимуляторов сокращения гладких мышц (ацетилхолина, окситоцина, адреналина, гистамина, серотонина, КС1).

Первое исследование является, по существу, предварительным, позволяющим лишь отобрать те вещества, с которых наиболее целесообразно начать последующее целенаправленное изучение. В этом наборе тестов данная группа препаратов дает характерные изменения: в малых дозах не влияет на поведение животных или оказывает мягкое стимулирующее действие- с повышением доз признаки возбуждения ЦНС сочетаются с проявлениями стимуляции
систем — тремором, саливацией, гипергидрозом, диареей. В высоких, токсических дозах они вызывают судороги. В тестах взаимодействия обнаруживается преобладающее потенцирование ими эффекта м-холиномиметика ареколина при наличии усиливающего влияния и на эффекты других стимуляторов медианных систем мозга.
Все последующие тесты позволяют выявить влияние на холинэстеразу и нервно-мышечную передачу, сопоставить их выраженность и длительность. Опыты на гладкомышечных объектах дают основание разделить антихолинэстеразное действие и влияние непосредственно на возбудимую мембрану, в частности выяснить способность влиять на калиевые каналы мембраны. В последнем случае препараты усиливают действие всех стимуляторов гладкомышечного сокращения, кроме КС1. В то же время ингибиторы холинэстеразы практически не влияют на изолированные гладкомышечные объекты.
В процессе углубленного изучения дается количественная оценка каждого эффекта вещества по расширенному набору методов.
При этом необходимо исследовать: 1) действие веществ на нервно-мышечную передачу с использованием: а) большего разнообразия нервно-мышечных препаратов для выявления всего спектра стимулирующего действия, б) опытов на целостных животных, когда изучается влияние препаратов на нервно-мышечную передачу, эффекты стимуляции нерва, введения ацетилхолина, курареподобных миорелаксантов- сократительную активность гладкомышечных органов (кишечника) in vivo, в связи с целостным организмом;

1. влияние на эффекты ацетилхолина (гипотензивный и др.);
2. антагонизм с курареподобными миорелаксантами па изолированных нервно-мышечных препаратах и целостных животных- 4) влияние на ПКП и минПКП- 5) действие на сократительные ответы гладкомышечных органов с использованием всего возможного спектра агонистов- 6) воздействие на очищенные препараты холинэстеразы с определением констант ингибирования, типа ингибирования- 7) изменение калиевой проницаемости возбудимой мембраны с использованием метода фиксации напряжения на мембране, патча и определением вольт-амперных характеристик ионных токов мембраны (перехват Ранвье, изолированный нейрон)- 8) влияние на функции центральной нервной системы- поведенческие реакции- 9) взаимодействие со стимуляторами основных медиаторных систем мозга- 10) влияние на обучение животных- 11) действие веществ на ЭЭГ, вызванные потенциалы, транскаллозальные ответы- активность нейронов мозга- 12) анальгетические свойства препаратов.