Менингококки - микробиология с техникой микробиологических исследований
Возбудителем цереброспинального менингита является диплококк, впервые описанный А. Вексельбаумом (1887) и известный под названием менингококка — Neisseria meningitidis (рис. 69 и 70 на вклейке).
Рис. 69. Менингококк в чистой культуре.
Морфология. Менингококки имеют форму бобовидных кокков величиной от 0,8 до 1 мк. Кокки располагаются попарно и обращены друг к другу вогнутыми сторонами. В гною они обычно располагаются внутри лейкоцитов.
В культурах наряду с обычными менингококками встречаются мелкие и гигантские кокки, располагающиеся одиночно, парами и группами по четыре клетки. Менингококки хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красками, грамотрицательны.
Спор и капсул не образуют, неподвижны.
Рис. 71. Колонии менингококка на сывороточном агаре (увел. в 12 раз).
Культуральные и биохимические свойства. Менингококки размножаются в аэробных условиях, оптимальная температура роста 37°. Растут на питательных средах при добавлении белка, например асцитической жидкости или крови. После ряда пересевов менингококк начинает расти и на простых средах, давая на них сначала скудный, а в дальнейшем более обильный рост. Наилучшими средами для выращивания служат асцит-агар и асцит-бульон. На плотных средах колонии менингококков имеют вид дисков правильной округлой формы величиной около 3 мм, с гладкой блестящей поверхностью и нежными прозрачными краями (рис. 71). На бульоне менингококки дают диффузный рост с образованием небольшого осадка. Молоко не створаживают. Менингококки разлагают глюкозу и мальтозу с образованием кислоты.
Антигенная структура. Соответственно различию в структуре полисахаридов менингококки подразделяются на ряд серологических типов. Различают четыре типа менингококка: А, В, С и D. В СССР обнаружены менингококки только первых двух типов (А и В). Тип менингококка определяется реакцией агглютинации с типоспецифическими иммунными сыворотками.
Резистентность. Менингококки нестойки и вне организма быстро погибают. Нагревание до 50° убивает их в течение 5 минут, высушивание быстро губит- 1 % раствор карболовой кислоты убивает менингококка почти моментально.
Токсинообразование и патогенность для животных.
Токсин, образуемый менингококками, принадлежит к эндотоксинам. Лабораторные животные (кролики, морские свинки, мыши) малочувствительны к менингококку.
Патогенез и клиника цереброспинального менингита.
Источником инфекции при цереброспинальном менингите является больной человек, реконвалесцент и здоровый бактерионоситель. Заболевание передается главным образом капельным путем. Входными воротами для менингококка служит слизистая оболочка носоглотки, преимущественно миндалин, откуда он проникает в мозговые оболочки по лимфатическим путям или через кровь.
Инкубационный период равен 2—4 дням. Заболевание характеризуется быстрым подъемом температуры, сильной головной болью, рвотой, ригидностью (напряженностью) мышц затылка, расширением зрачков и т.д. Клинические явления обусловливаются гнойным воспалением оболочек головного и спинного мозга. Спинномозговая жидкость имеет гнойный характер.
Заболевание носит обычно спорадический характер, но иногда перерастает в обширные эпидемии.
Воспаление мозговых оболочек могут вызвать и другие микроорганизмы (стрептококки, стафилококки, пневмококки, туберкулезная палочка и др.). Однако обусловленные ими менингиты в отличие от менингококкового не имеют эпидемического распространения.
Помимо мозговых оболочек, менингококк может поражать суставы, клапаны сердца и явиться причиной сепсиса — менингококкцемии.
Иммунитет. Человек обладает естественной устойчивостью к менингококку. Об этом свидетельствует тот факт, что, несмотря на широкое носительство менингококка среди людей, носители этого микроорганизма заболевают сравнительно редко.
Продолжительность и прочность иммунитета, возникающего после перенесенного заболевания, изучены недостаточно. В крови реконвалесцентов обнаруживаются бактериолизины, агглютинины, преципитины и бактериотропины. Иммунитет к менингококкам рассматривается как клеточный фагоцитарный и гуморальный бактерицидный.
Микробиологическая диагностика. При лабораторной диагностике цереброспинального менингита материалом для исследования служит спинномозговая жидкость, получаемая путем люмбальной пункции. При менингите спинномозговая жидкость вытекает струйкой вследствие повышения давления в спинномозговом канале, в то время как при нормальном давлении она вытекает каплями.
Спинномозговую жидкость собирают в стерильные пробирки и немедленно подвергают исследованию. В случае пересылки материала в холодное время года необходимо принять меры к защите его от охлаждения (обвертывание ватой и т. п.).
Жидкость подвергают центрифугированию и из осадка делают мазки и посев на питательные среды. Присутствие в мазках грамотрицательных диплококков характерной формы (формы кофейного зерна), заключенных в полинуклеарах или находящихся вне клеток, говорит о наличии менингококков. Однако диагноз следует подтвердить выделением чистой культуры. Посев жидкости производится в чашки с асцит-агаром и кровяным агаром. Обычно засевают одновременно не менее 2—3 чашек. При благоприятных условиях культивирования рост наблюдается через 18 часов иногда только к концу 2-х суток. Идентификация проводится в реакции агглютинации. Для определения типа менингококка необходимо иметь агглютинирующие сыворотки типа А и В.
Практическое значение для диагностики имеет также реакция преципитации, которая ставится с отцентрифугированной спинномозговой жидкостью.
При менингококкцемиях удается выделить менингококки из крови. Посевы крови для обнаружения бактериемии производят на 100—200 мл асцитического или сывороточного бульона.
При исследовании на бактерионосительство слизь из носоглотки снимают стерильным ватным тампоном, укрепленным на изогнутой проволоке.
В лаборатории полученную слизь засевают на асцитический или сывороточный агар. Идентификация культур, выделяемых при бактерионосительстве, представляет некоторые трудности вследствие того, что в зеве встречается ряд сапрофитных грамотрицательных диплококков, морфологически весьма сходных с менингококками. Их отличия представлены в табл. 10.
Таблица 10 Биохимические свойства бактерий, выделяемых из зева
Углеводы
Вид микроба | Глюкоза | Мальтоза | Левулеза | Галактоза | Лактоза | Сахароза | Маннит | Дульцит |
Micrococcus catarrhal is | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Micrococcus pharyngeus cinereus | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Neisseria gonorrhoeae | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Neisseria meningitidis А, В, C, D | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus flavus III | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
Diplococcus pharyngeus flavus II | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus flavus I | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus siccus | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus crassus | + | + | + | + | + | + | 0 | 0 |
Специфическая терапия и профилактика. Для лечения эпидемического цереброспинального менингита в настоящее время с большим успехом применяют препараты сульфаниламидного ряда и антибиотики (пенициллин и др.).
Эти же препараты применяются для санации менингококковых носителей.
