Сальмонеллы - микробиология с техникой микробиологических исследований

ВОЗБУДИТЕЛИ ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ (САЛЬМОНЕЛЛЫ)
Пищевые отравления (пищевые токсикоинфекции) вызывают различные микроорганизмы: энтеротоксические штаммы стафилококков, кишечной палочки, протей, палочка Моргана и др. Однако при пищевых токсикоинфекциях чаще всего высеваются бактерии рода Salmonella, первый представитель которого S. cholerae suis был описан впервые в 1885 г. американским ученым Салмоном, именем которого и названа эта группа бактерий. В отличие от бактерий тифо-паратифозной группы, сальмонеллы поражают как человека, так и многих животных и птиц (крупный и мелкий рогатый скот, свиней, лошадей, собак, кошек, грызунов, кур, уток и др.).
Пищевые отравления, вызываемые сальмонеллами, называются сальмонеллезами. В настоящее время насчитывается более 900 разновидностей группы сальмонелл. В возникновении сальмонеллеза основная роль принадлежит: 1) S. typhimurium (бреславльская палочка), 2) S. cholerae suis (бактерия холеры свиней) и 3) S. епteritidis (бактерия Гертнера).

Морфология и тинкториальные свойства. Возбудители токсикоинфекций по величине, форме и окрашиваемости сходны с остальными бактериями кишечно-тифозной группы. Они подвижны, обладают перитрихиально расположенными жгутиками, грамотрицательны.
Культуральные и биохимические свойства. На питательных средах возбудители сальмонеллезов по своему росту мало чем отличаются от бактерий паратифа В Шоттмюллера.
Лактозы и сахарозы не разлагают. Глюкозу, мальтозу и маннит сбраживают с образованием кислоты и газа. Индола не образуют. Лакмусовое молоко щелочат, желатины не разжижают.
Для дифференциации видов паратифозной группы сальмонелл пользуются определением ферментирующей способности бактерий в отношении рамнозы, глицерина, дульцита и арабинозы.
Антигенная структура и классификация сальмонелл. Близкое родство между различными микробами группы пищевых отравлений обусловливает трудность их дифференциации на основании морфологии, культуральных и биохимических признаков.
Антигенная структура сальмонелл послужила базой для их классификации. В основу этой классификации положены различия в строении О- и Н-антигенов (табл. 15).
Путем иммунизации кроликов типовыми антигенами получены соответствующие агглютинирующие сыворотки, которые помогают идентифицировать культуры группы сальмонелл при лабораторной диагностике.

Дифференциальная характеристика основных видов бактерий рода Salmonella (по антигенной структуре)

Резистентность. Сальмонеллы переносят нагревание при температуре 70° в течение 20 минут, а внутри большого куска мяса или колбасы остаются живыми даже после кипячения в течение нескольких минут.
Патогенность для животных и токсинообразование. Многие сальмонеллы, обладая полипатогенными свойствами, вирулентны для экспериментальных животных. Наиболее чувствительны к ним белые мыши, которые заболевают и погибают при явлениях сепсиса как при парентеральном, так и при пероральном заражении. При разрушении сальмонелл освобождается сильнодействующий эндотоксин.
Патогенез и клиника. Источниками инфекции при сальмонеллезах являются различные животные, птицы и в меньшей степени люди — больные и здоровые бактерионосители. Сальмонеллезные токсикоинфекции преимущественно связаны с употреблением зараженных мясных продуктов. Заболевание человека наступает в результате употребления плохо проваренного и прожаренного мяса, недостаточно простерилизованных консервов или непрокипяченного молока. Причиной пищевых отравлений могут быть инфицированные яйца кур и уток. Пораженное мясо или другие пищевые продукты, по вкусу и запаху не вызывая никаких подозрений, могут быть инфицированы сальмонеллами. Сальмонеллезы могут давать контактные и контактно-пищевые эпидемические вспышки, особенно среди детей младшего возраста.
Все клинические явления при сальмонеллезах возникают в результате попадания в желудочно-кишечный тракт большой массы микробов, размножившихся в пище (мясе) и введенных вместе с нею через рот. При этом в результате распада микробов сразу освобождается большое количество эндотоксина, который обусловливают интоксикацию. Эндотоксин не только оказывает прямое действие на желудочно-кишечный тракт, но и ускоряет проникновение части микробов в лимфатическое и кровяное русло, а затем и во внутренние органы. В результате наступает инфекционный процесс. Клинический термин «токсикоинфекция» отражает сложную картину заболевания, в которой на первый план выступают явления интоксикации и в меньшей степени инвазионное действие микробов.
Инкубационный период при сальмонеллезах может быть от нескольких часов до 2—3 дней.
Протекают сальмонеллезы в виде острых гастроэнтеритов, энтероколитов и гастроэнтероколитов. Иногда встречаются сальмонеллезы с признаками тифозного состояния и септицемии.
Заболевания начинаются остро и характеризуются болями в животе, тошнотой, рвотой, иногда с желчью. При энтероколитах — понос со слизью, иногда с кровью. Печень и селезенка увеличены. Температура повышается не всегда. Встречаются сальмонеллезы с ярко выраженными нервными симптомами (судороги, параличи различных мышц). У взрослых заболевание заканчивается выздоровлением в течение 1—2 дней, у детей может затягиваться. В очень тяжелых случаях наблюдается сильная интоксикация организма с летальным исходом.
Микробиологическая диагностика. Материалом для лабораторного исследования могут служить: 1) выделения больных (кал, рвотные массы и промывные воды желудка)- 2) пищевые продукты (мясо, мясные блюда и изделия)- 3) кровь больных.
Выделения больных и подозреваемые продукты исследуются по обычной методике бактериологического анализа на присутствие паратифозных бактерий с применением сред накопления,
Первый день. Посев материала на 2—3 чашки со средой Эндо, Левина, бактоагар Ж (и на среду обогащения (Кауфмана или Мюллера). С последней производится пересев через 18 часов на дифференциальную среду.
Второй день. Отбор бесцветных колоний (не разлагающих молочного сахара), пересев на среду Ресселя или на короткий пестрый ряд (глюкоза, мальтоза, лактоза, маннит) и скошенный агар.
Третий день. Просмотр пестрых рядов. Дальнейшее исследование культур, вызвавших ферментацию глюкозы, для чего из пробирки со скошенным агаром делают пересев на развернутый пестрый ряд, на мясопептонный бульон и ставят ориентировочную реакцию агглютинации на обнаружение сальмонелл: со смесью адсорбированных поливалентных сывороток для установления принадлежности к роду сальмонелл, затем с каждой О-сывороткой для определения серологической группы и для идентификации серологического типа с монорецепторными Н-сыворотками.
Четвертый день. Учет пестрого ряда и постановка пробы на индол с посевом на бульоне.
Для обнаружения сальмонелл можно применить и экспериментальный метод. В первый день исследования заражают белых мышей путем вскармливания материалом, поступившем на исследование в лабораторию, или смывом выделенной культуры сальмонелл, которым пропитывают кусочек белого хлеба. . При вскрытии обнаруживают увеличенную селезенку, иногда и печень. Посев крови из сердца и материала из внутренних органов дает рост сальмонелл.
Серологическое исследование крови больных производится с целью выявления агглютининов по типу реакции Видаля («сальмонеллезный Видаль») с антигенами основных представителей сальмонелл.
Профилактика. Специфической профилактики сальмонеллезов не существует. Основные мероприятия по предупреждению токсикоинфекций сводятся к недопущению в продажу инфицированных продуктов и установлению санитарного надзора за предприятиями пищевого блока (магазины, столовые и т. д.).