Исследование лейкоцитов - практические навыки педиатра
Видео: Практические навыки по физиологии Определение остроты зрения с помощью таблиц
Для исследования лейкоцитов производят подсчет лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, оценивают морфологические особенности.
Подсчет лейкоцитов. Капиллярной пипеткой набирают 0,2 мл цитратной крови, вносят в пробирку с 0,4 мл 3—5 % раствора уксусной кислоты и перемешивают. Лейкоциты считают в 100 больших квадратах, что соответствует 1600 малым (100Х 16). Количество лейкоцитов вычисляют по формуле
где X — содержание форменных элементов в 1 мкл крови, а — число лейкоцитов, сосчитанных в определенном количестве малых квадратов- b — степень разведения крови (20)- В — количество сосчитанных малых квадратов (1600). При работе с цитратной кровью полученный результат умножают на 1,25.
Число лейкоцитов можно подсчитать также с помощью целлоскопа или аппарата «Пикаскаль». В норме количество лейкоцитов у взрослых колеблется от 4 до 9 • 10+9 в 1 л крови. Повышение количества лейкоцитов (лейкоцитоз, гиперлейкоцитоз) наблюдается при гнойно-септических заболеваниях, инфекционном лимфоцитозе, гемолитических анемиях, мононуклеозе, ацидотических, коматозных, токсических состояниях, злокачественных опухолях и др.
Лейкопения встречается при более тяжелых инфекционных и токсических состояниях и является неблагоприятным признаком. Лейкопенией сопровождаются некоторые гиповитаминозы, эндокринные (болезни Аддисона, Симондса) и вирусные заболевания (грипп и др.), дистрофии, прием отдельных лекарственных препаратов (амидопирин, сульфаниламиды, атофан, цитостатики и др.) Выраженная лейкопения наблюдается при агранулоцитозе, апластических анемиях, лейкозе.
Подсчет лейкоцитарной формулы. Необходимой предпосылкой для правильного учета морфологических особенностей клеток при подсчете лейкоцитарной формулы является удачно сделанный и хорошо окрашенный мазок. Мазки крови можно окрасить различными методами. Наибольшее распространение из них получил метод Романовского, который базируется на окрашивании элементов клеток в разные цвета и оттенки смесью основных (азурп) и кислых красок (водорастворимый желтый эозин). Перед окраской мазки фиксируют метанолом. При подсчете лейкоцитарной формулы находят 100 лейкоцитов и соотношение отдельных видов выражают в процентах. Лейкоцитарная формула дает представление только об относительных величинах, поэтому, определив
процентное соотношение тех или иных видов клеток, следует вычислить абсолютное число их в 1 л крови.
При исследовании лейкоцитарной формулы учитывается сдвиг ядер нейтрофилов — индекс сдвига ядер (ИС), который находится по формуле
И С = (миелоциты + метамиелоциты + палочкоядерные нейтрофилы) / сегментоядерные нейтрофилы
В норме ИС равен 0,06.
Повышение количества незрелых нейтрофильных клеток в крови свидетельствует о сдвиге формулы влево. Наличие клеток с гиперсегментированным ядром характеризуется как сдвиг формулы вправо.
У детей и взрослых лейкоцитарные формулы существенно отличаются (табл. 43). У новорожденных соотношение между нейтрофильными клетками и лимфоцитами примерно такое же, как у взрослых, т. е. в среднем 65 % составляют нейтрофильные клетки и 25 % лимфоциты (рис. 53). После рождения процент нейтрофилов быстро убывает, а лимфоцитов возрастает, и к 3—7-му дню жизни они уравниваются. Это так называемый первый «перекрест» лейкоцитов.
Табл. 43. Количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула у детей в зависимости от возраста (по данным А. Ф. Тура, Н. П. Шабалова,
1970- И. Тодорова, 1973)
Р и с. 53. Первый и второй перекресты кривых нейтрофилов и лимфоцитов у детей:
сплошная линия — нейтрофилы- пунктирная лимфоциты
Впоследствии количество лимфоцитов продолжает повышаться, а нейтрофилов убывать и к концу первого года лимфоциты достигают максимального числа (65 %), а нейтрофилы минимального (25 %) По истечении первого года число лимфоцитов начинает медленно уменьшаться, а нейтрофилов увеличиваться, и к 3—5-му году наступает второй «перекрест» лейкоцитов В дальнейшем процент нейтрофилов нарастает до нормы у взрослых.
Морфология лейкоцитов. Чтобы составить полную картину изменений лейкоцитов, необходимо оценить их морфологические особенности.
При описании нейтрофильных гранулоцитов надо отмечать особенности ядра (пикноз, сегментация, вакуолизация) и цитоплазмы (базофильные включения, вакуолизация и зернистость, ее величина, однородность). При характеристике лимфоцитов следует указывать на признаки незрелости ядра (нуклеолы, сетчатое строение), базофильность, увеличение и вакуолизацию цитоплазмы
Изменения в морфологии гранулоцитов и лимфоцитов дают ценные диагностические и прогностические сведения. Большое значение имеет обнаружение в периферической крови бластных клеток, свойственных острому лейкозу. При выявлении единичных бластных или сомнительных клеток необходимо исследовать пунктах костного мозга
